-
Aroomiteraapia puhas looduslik eukalüptilehtede eeterlik õli naha ja keha hoolduseks
Ekstraheerimis- või töötlemismeetod: auruga destilleeritud
Destilleerimise ekstraheerimise osa: leht
Päritolumaa: Hiina
Kasutamine: hajutus/aroomiteraapia/massaaž
Säilivusaeg: 3 aastat
Kohandatud teenus: kohandatud silt ja kast või vastavalt teie vajadusele
Sertifitseerimine: GMPC/FDA/ISO9001/MSDS/COA
Eukalüptiõli reageerib limaga ja vedeldab seda, pakkudes kohest leevendust õhupuuduse ja muude hingamisteede probleemide korral. See on piisavalt võimas, et toimida putukatõrjevahendina. Aroomiteraapias kasutamisel annab see mõtetele selguse. Selle terapeutilised eelised tulenevad antimikroobsetest, antibakteriaalsetest, antiseptilistest, spasmolüütilistest ja viirusevastastest omadustest. Kasutage eukalüptiõli mitmesuguste naha- ja terviseprobleemide korral. See sisaldab eukalüptooli, mida tuntakse ka tsineoolina. See ühend toetab teie üldist tervist ja heaolu.
-
Looduslik puhas orgaaniline lavendli eeterlik õli aroomiteraapia nahahoolduseks
Ekstraheerimis- või töötlemismeetod: auruga destilleeritud
Destilleerimise ekstraheerimise osa: lill
Päritolumaa: Hiina
Kasutamine: hajutus/aroomiteraapia/massaaž
Säilivusaeg: 3 aastat
Kohandatud teenus: kohandatud silt ja kast või vastavalt teie vajadusele
Sertifitseerimine: GMPC/FDA/ISO9001/MSDS/COA
-
100% puhas looduslik orgaaniline Magnoliae Officmalis Cortex õli eeterlik õli nahahoolduseks
Hou Po aroom on koheselt mõrkjas ja teravalt vürtsikas, seejärel avaneb see järk-järgult sügava, siirupise magususe ja soojusega.
Hou Po on seotud Maa ja Metalli elementidega, kus selle kibe soojus avaldab tugevat mõju Qi ja kuiva niiskuse allavoolule. Nende omaduste tõttu kasutatakse seda Hiina meditsiinis seedetraktis stagnatsiooni ja kogunemise leevendamiseks, samuti köha ja vilistava hingamise korral, mis on tingitud röga ummistusest kopsudes.
Harilik magnoolia (Magnolia Officinials) on heitlehine puu, mis on pärit Sichuani, Hubei ja teiste Hiina provintside mägedest ja orgudest. Traditsioonilises Hiina meditsiinis kasutatav väga aromaatne koor eemaldatakse vartelt, okstelt ja juurtelt ning kogutakse aprillist juunini. Paks, sile ja õline koor on siseküljel lillaka värvusega ja kristallilise läikega.
Praktiseerijad võivad kaaluda Hou Po ja Qing Pi eeterliku õli kombineerimist tipunootidena segudes, mille eesmärk on kuhjumiste lõhustamine.
-
OEM-i kohandatud pakendis looduslik Macrocephalae risoomiõli
Tõhusa keemiaravi ainena on 5-fluorouratsiil (5-FU) laialdaselt kasutusel pahaloomuliste kasvajate ravis seedetraktis, peas, kaelas, rinnus ja munasarjades. 5-FU on kliinikus kolorektaalse vähi esmavaliku ravim. 5-FU toimemehhanism on blokeerida kasvajarakkudes uratsiilnukleiinhappe muundumist tümiinnukleiinhappeks ning seejärel mõjutada DNA ja RNA sünteesi ja parandamist, et saavutada tsütotoksiline toime (Afzal jt, 2009; Ducreux jt, 2015; Longley jt, 2003). Siiski põhjustab 5-FU ka keemiaravist tingitud kõhulahtisust (CID), mis on üks levinumaid kõrvaltoimeid, mis vaevab paljusid patsiente (Filho jt, 2016). Kõhulahtisuse esinemissagedus 5-FU-ga ravitud patsientidel oli kuni 50–80%, mis mõjutas tõsiselt keemiaravi edukust ja efektiivsust (Iacovelli jt, 2014; Rosenoff jt, 2006). Seetõttu on 5-FU-st põhjustatud CID-i jaoks efektiivse ravi leidmine äärmiselt oluline.
Praegu on KIS-i kliinilisse ravisse sisse viidud nii ravimivabad kui ka ravimid. Ravimivabad sekkumised hõlmavad mõistlikku dieeti ning soola, suhkru ja muude toitainete lisamist. KIS-i kõhulahtisusevastases ravis kasutatakse tavaliselt ravimeid nagu loperamiid ja oktreotiid (Benson jt, 2004). Lisaks on KIS-i raviks erinevates riikides kasutusele võetud ka etnomeditsiine, millel on oma ainulaadne teraapia. Traditsiooniline hiina meditsiin (TCM) on tüüpiline etnomeditsiin, mida on Ida-Aasia riikides, sealhulgas Hiinas, Jaapanis ja Koreas, praktiseeritud enam kui 2000 aastat (Qi jt, 2010). TCM väidab, et keemiaravi ravimid põhjustavad qi tarbimist, põrna puudulikkust, mao disharmooniat ja endofüütilist niiskust, mille tulemuseks on soolestiku juhtiv düsfunktsioon. TCM-i teooria kohaselt peaks KIS-i ravistrateegia peamiselt põhinema qi täiendamisel ja põrna tugevdamisel (Wang jt, 1994).
Kuivatatud juuredAtractylodes macrocephalusKoidz. (AM) jaPanaxi ženšennCA Mey. (PG) on traditsioonilises Hiina meditsiinis tüüpilised taimsed ravimid, millel on sama toime qi täiendamisel ja põrna tugevdamisel (Li jt, 2014). AM-i ja PG-d kasutatakse tavaliselt ravimtaimepaarina (Hiina ravimtaimede ühilduvuse lihtsaim vorm), millel on qi täiendamise ja põrna tugevdamise toime kõhulahtisuse raviks. Näiteks on AM-i ja PG-d dokumenteeritud klassikalistes kõhulahtisusevastastes ravimites, nagu Shen Ling Bai Zhu San, Si Jun Zi Tang ...Taiping Huimin Heji Ju Fang(Song dünastia, Hiina) ja Bu Zhong Yi Qi Tang päritPi Wei Lun(Yuani dünastia, Hiina) (joonis 1). Mitmed varasemad uuringud on teatanud, et kõigil kolmel valemil on võime leevendada KIS-i (Bai jt, 2017; Chen jt, 2019; Gou jt, 2016). Lisaks näitas meie varasem uuring, et Shenzhu kapslitel, mis sisaldavad ainult AM-i ja PG-d, on potentsiaalne mõju kõhulahtisuse, koliidi (xiexie sündroom) ja teiste seedetrakti haiguste ravis (Feng jt, 2018). Siiski pole ükski uuring käsitlenud AM-i ja PG mõju ja mehhanismi KIS-i ravis, olgu siis kombinatsioonis või eraldi.
Nüüdseks peetakse soolestiku mikrobiootat potentsiaalseks teguriks traditsioonilise traditsioonilise meditsiini terapeutilise mehhanismi mõistmisel (Feng jt, 2019). Kaasaegsed uuringud näitavad, et soolestiku mikrobiootal on soole homöostaasi säilitamisel oluline roll. Tervislik soolestiku mikrobioota aitab kaasa soole limaskesta kaitsele, ainevahetusele, immuunhomeostaasile ja -vastusele ning patogeenide pärssimisele (Thursby ja Juge, 2017; Pickard jt, 2017). Häiritud soolestiku mikrobioota kahjustab otseselt või kaudselt inimkeha füsioloogilisi ja immuunfunktsioone, põhjustades kõrvalreaktsioone nagu kõhulahtisus (Patel jt, 2016; Zhao ja Shen, 2010). Uuringud on näidanud, et 5-FU muutis märkimisväärselt soolestiku mikrobioota struktuuri kõhulahtisusega hiirtel (Li jt, 2017). Seega võib AM ja PM mõju 5-FU põhjustatud kõhulahtisusele olla vahendatud soolestiku mikrobioota poolt. Siiski on teadmata, kas AM ja PG üksi ja kombinatsioonis suudavad ennetada 5-FU põhjustatud kõhulahtisust soolestiku mikrobioota moduleerimise kaudu.
AM ja PG kõhulahtisusevastase toime ja selle aluseks oleva mehhanismi uurimiseks kasutasime hiirtel kõhulahtisuse mudeli simuleerimiseks 5-FU-d. Siin keskendusime üksik- ja kombineeritud manustamise (AP) võimalikele mõjudele.Atractylodes macrocephaluseeterlik õli (AMO) jaPanaxi ženšennKogusaponiinide (PGS), vastavalt AM-ist ja PG-st ekstraheeritud aktiivsete komponentide, mõju kõhulahtisusele, soolepatoloogiale ja mikroobide struktuurile pärast 5-FU keemiaravi.
-
100% puhas looduslik eucommiae fooliumõli eeterlik õli nahahoolduseks
Eucommia ulmoides(EU) (hiina keeles nimetatakse seda tavaliselt „Du Zhongiks“) kuuluvad eucommiaceae sugukonda, mis on Kesk-Hiinast pärit väike puu.1]. Seda taime kasvatatakse Hiinas laialdaselt ja suures mahus selle meditsiinilise tähtsuse tõttu. EU-st on eraldatud umbes 112 ühendit, sealhulgas lignaanid, iridoidid, fenoolid, steroidid ja muud ühendid. Selle taime täiendavad ürtide valemid (näiteks maitsev tee) on näidanud mõningaid raviomadusi. EU lehel on suurem aktiivsus, mis on seotud ajukoore, õie ja viljaga [2,3On teatatud, et EU lehed tugevdavad luid ja keha lihaseid [4], mis viib inimeste pikaealisuseni ja viljakuse edendamiseni [5]. EU lehtedest valmistatud maitsev teesegu vähendab väidetavalt rasvasust ja parandab energiavahetust. Flavonoidühenditel (nagu rutiin, klorogeenhape, feruulhape ja kofeiinhape) on EU lehtedes teatatud antioksüdantsest aktiivsusest [6].
Kuigi EU fütokeemiliste omaduste kohta on piisavalt kirjandust, on EU koortest, seemnetest, vartest ja lehtedest ekstraheeritud erinevate ühendite farmakoloogiliste omaduste kohta vähe uuringuid. See ülevaateartikkel selgitab üksikasjalikku teavet EU erinevatest osadest (koored, seemned, vars ja lehed) ekstraheeritud erinevate ühendite ja nende ühendite potentsiaalse kasutuse kohta tervist edendavate omaduste osas teaduslike tõendite abil, pakkudes seega võrdlusmaterjali EU rakendamiseks.
-
Puhas naturaalne Houttuynia cordata õli, Houttuynia cordata õli, Lchthammolum õli
Enamikus arengumaades tugineb 70–95% elanikkonnast esmatasandi tervishoius traditsioonilistele ravimitele ja neist 85% kasutab toimeainena taimi või nende ekstrakte.1Uute bioloogiliselt aktiivsete ühendite otsing taimedest sõltub tavaliselt kohalikelt praktikutelt saadud spetsiifilisest etnilisest ja rahvapärasest teabest ning seda peetakse endiselt oluliseks ravimite avastamise allikaks. Indias on umbes 2000 ravimit taimset päritolu.2] Pidades silmas laialdast huvi ravimtaimede kasutamise vastu, on käesolev ülevaadeHouttuynia cordataThunb. pakub ajakohast teavet kirjanduses ilmunud botaaniliste, kaubanduslike, etnofarmakoloogiliste, fütokeemiliste ja farmakoloogiliste uuringute kohta.H. cordataThunb. kuulub perekondaSaururaceaeja seda tuntakse ka hiina sisaliku saba nime all. See on mitmeaastane taim, millel on kõrkjate võradega risoom ja kaks erinevat kemotüüpi.3,4] Liigi hiina kemotüüpi leidub India kirdeosas metsikutes ja poolmetsikutes tingimustes aprillist septembrini.5,6,7]H. cordataon saadaval Indias, eriti Assami Brahmaputra orus, ning seda kasutavad erinevad Assami hõimud nii köögivilja kujul kui ka traditsiooniliselt mitmesugustel meditsiinilistel eesmärkidel.
-
100% puhas Arctium lappa õli tootja – looduslik laimiõli kvaliteeditagamise sertifikaatidega
Tervisele kasulik
Takjajuurt süüakse sageli, kuid seda saab ka kuivatada ja tee sisse leotada. See toimib hästi inuliini allikana, mis onprebiootikumkiudained, mis soodustavad seedimist ja parandavad soolestiku tervist. Lisaks sisaldab see juur flavonoide (taimseid toitaineid),fütokemikaalidja antioksüdante, millel on teadaolevalt tervisele kasulik mõju.
Lisaks võib takjasjuur pakkuda ka muid eeliseid, näiteks:
Vähendage kroonilist põletikku Takjajuur sisaldab mitmeid antioksüdante, näiteks kvertsetiini, fenoolhappeid ja luteoliini, mis aitavad kaitsta teie rakkevabad radikaalidNeed antioksüdandid aitavad vähendada põletikku kogu kehas.
Terviseriskid
Takjajuure söömine ja teena joomine on ohutu. See taim sarnaneb aga väga mürgiste belladonna-taimedega. Soovitatav on osta takjajuurt ainult usaldusväärsetelt müüjatelt ja hoiduda selle iseseisvast kogumisest. Lisaks on selle mõju kohta lastele või rasedatele naistele vähe teavet. Enne takjajuure kasutamist lastel või raseduse ajal pidage nõu oma arstiga.
Siin on mõned muud võimalikud terviseriskid, mida takjasjuure kasutamisel arvestada:
Suurenenud dehüdratsioon
Takjajuur toimib loodusliku diureetikumina, mis võib põhjustada dehüdratsiooni. Kui te võtate veepillide või muude diureetikumide võtmise ajal, ei tohiks te takjajuurt võtta. Nende ravimite võtmisel on oluline olla teadlik teistest ravimitest, ravimtaimedest ja koostisosadest, mis võivad põhjustada dehüdratsiooni.
Allergiline reaktsioon
Kui olete tundlik karikakarde, ambroosia või krüsanteemide suhtes või teil on esinenud allergilisi reaktsioone nende suhtes, on teil suurem risk takjajuure suhtes allergilise reaktsiooni tekkeks.
-
Hulgimüügihind 100% puhas AsariRadix Et Rhizoma õli Relax Aromatherapy Eucalyptus globulus
Loomkatsed ja in vitro uuringud on uurinud sassafrase ja selle komponentide võimalikke seenevastaseid, põletikuvastaseid ja kardiovaskulaarseid toimeid. Kliinilised uuringud aga puuduvad ja sassafrast ei peeta ohutuks kasutamiseks. Safrooli, sassafrase juure koore ja õli peamise koostisosa, on USA Toidu- ja Ravimiamet (FDA) keelanud, sealhulgas kasutamise lõhna- ja maitseainena, ning seda ei tohiks kasutada ei sisemiselt ega väliselt, kuna see on potentsiaalselt kantserogeenne. Safrooli on kasutatud 3,4-metüleendioksümetamfetamiini (MDMA), tuntud ka tänavanimede "ecstasy" või "Molly" all, ebaseaduslikus tootmises ning safrooli ja sassafrase õli müüki jälgib USA Narkootikumidevastase Ameti (Drug Enforcement Administration) tegevus.
-
Hulgimüügihind 100% puhas Stellariae Radix eeterlik õli (uus) Relax Aromatherapy Eucalyptus globulus
Hiina farmakopöa (2020. aasta väljaanne) nõuab, et YCH metanooliekstrakti sisaldus ei tohiks olla väiksem kui 20,0% [2], ilma et muid kvaliteedihindamise näitajaid oleks täpsustatud. Selle uuringu tulemused näitavad, et nii looduslike kui ka kultiveeritud proovide metanooliekstraktide sisaldus vastas farmakopöa standardile ja nende vahel ei olnud olulist erinevust. Seetõttu ei olnud selle indeksi kohaselt looduslike ja kultiveeritud proovide vahel ilmseid kvaliteedierinevusi. Siiski oli looduslike proovide steroolide ja flavonoidide kogusisaldus oluliselt kõrgem kui kultiveeritud proovides. Edasine metaboloomiline analüüs näitas looduslike ja kultiveeritud proovide vahel suurt metaboliitide mitmekesisust. Lisaks sõeluti välja 97 oluliselt erinevat metaboliiti, mis on loetletud tabelis.Lisatabel S2Nende oluliselt erinevate metaboliitide hulka kuuluvad β-sitosterool (ID on M397T42) ja kvertsetiini derivaadid (M447T204_2), mis on teatatud kui aktiivsed koostisosad. Varem teatamata komponendid, nagu trigonelliin (M138T291_2), betaiin (M118T277_2), fustiin (M269T36), rotenoon (M241T189), arktiin (M557T165) ja logaanhape (M399T284_2), olid samuti erinevate metaboliitide hulgas. Need komponendid mängivad mitmesuguseid rolle antioksüdatsioonis, põletikuvastases toimes, vabade radikaalide püüdmises, vähivastases võitluses ja ateroskleroosi ravis ning seetõttu võivad need olla YCH-s oletatavad uued aktiivsed komponendid. Toimeainete sisaldus määrab ravimmaterjalide efektiivsuse ja kvaliteedi [7Kokkuvõttes on metanooliekstraktil kui ainsa YCH kvaliteedi hindamise indeksil mõned piirangud ning spetsiifilisemaid kvaliteedimarkereid tuleb lähemalt uurida. Loodusliku ja kultiveeritud YCH vahel esines olulisi erinevusi steroolide, flavonoidide ja paljude teiste diferentsiaalsete metaboliitide sisalduses; seega oli nende vahel potentsiaalselt mõningaid kvaliteedierinevusi. Samal ajal võivad YCH äsja avastatud potentsiaalsed toimeained olla oluliseks võrdlusväärtuseks YCH funktsionaalse aluse uurimisel ja YCH ressursside edasisel arendamisel.
Ehtsate meditsiiniliste materjalide olulisust on päritolupiirkonnas juba ammu tunnustatud suurepärase kvaliteediga Hiina taimsete ravimite tootmisel.8Kõrge kvaliteet on ehtsate meditsiiniliste materjalide oluline omadus ja elupaik on oluline tegur, mis mõjutab selliste materjalide kvaliteeti. Sellest ajast peale, kui YCH-d hakati ravimina kasutama, on seda pikka aega domineerinud metsik YCH. Pärast YCH edukat sissetoomist ja kodustamist Ningxias 1980. aastatel nihkus Yinchaihu meditsiiniliste materjalide allikas järk-järgult metsikult kultiveeritud YCH-le. Varasema YCH allikate uurimise kohaselt [9] ja meie uurimisrühma väliuuringud näitavad olulisi erinevusi kultiveeritud ja looduslike ravimmaterjalide levikualadel. Looduslik YCH on levinud peamiselt Shaanxi provintsi Ningxia Hui autonoomses piirkonnas, mis külgneb Sise-Mongoolia kuiva tsooniga ja Ningxia keskosaga. Eelkõige on nende piirkondade kõrbe-stepp YCH kasvuks kõige sobivam elupaik. Seevastu kultiveeritud YCH on levinud peamiselt loodusliku levikuala lõunaosas, näiteks Tongxini maakonnas (kultiveeritud I) ja selle ümbruses, millest on saanud Hiina suurim kasvatus- ja tootmisbaas, ning Pengyangi maakonnas (kultiveeritud II), mis asub lõunapoolsemas piirkonnas ja on veel üks kultiveeritud YCH tootmispiirkond. Lisaks ei ole kahe eespool nimetatud kultiveeritud ala elupaigad kõrbe-stepp. Seetõttu on lisaks tootmisviisile olulisi erinevusi ka loodusliku ja kultiveeritud YCH elupaigas. Elupaik on oluline tegur, mis mõjutab taimsete ravimmaterjalide kvaliteeti. Erinevad elupaigad mõjutavad sekundaarsete metaboliitide teket ja akumuleerumist taimedes, mõjutades seeläbi ravimite kvaliteeti [10,11Seega võivad selles uuringus leitud olulised erinevused flavonoidide ja steroolide kogusisalduses ning 53 metaboliidi ekspressioonis olla tingitud põllu majandamise ja elupaikade erinevustest.Üks peamisi viise, kuidas keskkond mõjutab ravimmaterjalide kvaliteeti, on stressi avaldamine lähtetaimedele. Mõõdukas keskkonnastress kipub stimuleerima sekundaarsete metaboliitide akumuleerumist [12,13Kasvu/diferentseerumise tasakaalu hüpotees väidab, et kui toitaineid on piisavalt, siis taimed peamiselt kasvavad, samas kui toitaineid on vähe, siis taimed peamiselt diferentseeruvad ja toodavad rohkem sekundaarseid metaboliite [14Veepuudusest tingitud põuastress on peamine keskkonnastress, millega taimed kuivades piirkondades silmitsi seisavad. Käesolevas uuringus on kultiveeritud YCH veeseisund rikkalikum, aastane sademete hulk on oluliselt kõrgem kui loodusliku YCH-l (veevarustus kultiveeritud I puhul oli umbes 2 korda suurem kui looduslikul; kultiveeritud II puhul oli see umbes 3,5 korda suurem kui looduslikul). Lisaks on loodusliku keskkonna pinnas liivane, kuid põllumaa pinnas on savine. Võrreldes saviga on liivasel pinnasel halb veepeetusvõime ja see süvendab põuastressi tõenäolisemalt. Samal ajal kaasnes harimisprotsessiga sageli kastmine, seega oli põuastressi aste madal. Metsik YCH kasvab karmides looduslikes kuivades elupaikades ja seetõttu võib see kannatada tõsisema põuastressi all.Osmoregulatsioon on oluline füsioloogiline mehhanism, mille abil taimed põuastressiga toime tulevad, ja alkaloidid on kõrgemates taimedes olulised osmootsed regulaatorid [1].15Betaiinid on vees lahustuvad alkaloidsed kvaternaarsed ammooniumühendid ja võivad toimida osmoprotektantidena. Põud võib vähendada rakkude osmootset potentsiaali, samas kui osmoprotektandid säilitavad ja hoiavad alal bioloogiliste makromolekulide struktuuri ja terviklikkust ning leevendavad tõhusalt põuastressi põhjustatud kahjustusi taimedele [16Näiteks põua ajal suurenes suhkrupeedi ja hariliku pählika betaiinisisaldus märkimisväärselt [17,18Trigonelliin on rakkude kasvu regulaator ja põua korral võib see pikendada taime rakutsükli pikkust, pärssida rakkude kasvu ja viia rakkude mahu vähenemiseni. Lahustunud aine kontsentratsiooni suhteline suurenemine rakus võimaldab taimel saavutada osmootse regulatsiooni ja suurendab oma võimet põuakindlale stressile vastu panna [19]. JIA X [20] leiti, et põuastressi suurenemisega tootis Astragalus membranaceus (traditsioonilise hiina meditsiini allikas) rohkem trigonelliini, mis reguleerib osmootset potentsiaali ja parandab võimet põuastressile vastu panna. Samuti on näidatud, et flavonoidid mängivad olulist rolli taimede põuastressikindluses [21,22Suur hulk uuringuid on kinnitanud, et mõõdukas põuastress soodustas flavonoidide akumuleerumist. Lang Duo-Yong jt. [23] võrdles põuastressi mõju YCH-le, kontrollides veepeetuse võimet põllul. Leiti, et põuastress pärssis teatud määral juurte kasvu, kuid mõõduka ja raske põuastressi korral (40% põllu veepeetuse võime) suurenes YCH flavonoidide kogusisaldus. Samal ajal võivad fütosteroolid põuastressi korral reguleerida rakumembraani voolavust ja läbilaskvust, pärssida veekaotust ja parandada stressikindlust [24,25Seega võib kogu flavonoidide, kogu steroolide, betaiini, trigonelliini ja teiste sekundaarsete metaboliitide suurenenud akumuleerumine metsikus YCH-s olla seotud suure intensiivsusega põuastressiga.Selles uuringus viidi läbi KEGG raja rikastamise analüüs metaboliitidega, mille puhul leiti, et need erinevad metsiku ja kultiveeritud YCH vahel oluliselt. Rikastatud metaboliitide hulka kuulusid need, mis osalevad askorbaadi ja aldaraadi metabolismi, aminoatsüül-tRNA biosünteesi, histidiini metabolismi ja beeta-alaniini metabolismi radades. Need ainevahetusrajad on tihedalt seotud taimede stressiresistentsuse mehhanismidega. Nende hulgas mängib askorbaadi metabolism olulist rolli taimede antioksüdantide tootmises, süsiniku ja lämmastiku metabolismis, stressiresistentsuses ja muudes füsioloogilistes funktsioonides [].26]; aminoatsüül-tRNA biosüntees on oluline valgu moodustumise rada [27,28], mis osaleb stressiresistentsete valkude sünteesis. Nii histidiini kui ka β-alaniini rajad võivad suurendada taimede vastupidavust keskkonnastressile [29,30See näitab veelgi, et metaboliitide erinevused loodusliku ja kultiveeritud YCH vahel olid tihedalt seotud stressiresistentsuse protsessidega.Muld on ravimtaimede kasvu ja arengu materiaalne alus. Mullas sisalduv lämmastik (N), fosfor (P) ja kaalium (K) on taimede kasvu ja arengu jaoks olulised toitained. Mulla orgaaniline aine sisaldab ka N, P, K, Zn, Ca, Mg ning teisi ravimtaimedele vajalikke makro- ja mikroelemente. Liigne või puudulik toitainete sisaldus või tasakaalustamata toitainete vahekord mõjutavad ravimmaterjalide kasvu ja arengut ning kvaliteeti ning erinevatel taimedel on erinevad toitainevajadused [31,32,33Näiteks soodustas madal lämmastikustress alkaloidide sünteesi Isatis indigoticas ja oli kasulik flavonoidide akumuleerumisele sellistes taimedes nagu Tetrastigma hemsleyanum, Crataegus pinnatifida Bunge ja Dichondra repens Forst. Seevastu liiga palju lämmastikku pärssis flavonoidide akumuleerumist sellistes liikides nagu Erigeron breviscapus, Abrus cantoniensis ja Ginkgo biloba ning mõjutas ravimite kvaliteeti [34P-väetise kasutamine suurendas tõhusalt glütsürritsiinhappe ja dihüdroatsetooni sisaldust Uurali lagritsas [35Kui kasutuskogus ületas 0,12 kg·m−2, vähenes Tussilago farfara flavonoidide kogusisaldus [36P-väetise kasutamine avaldas negatiivset mõju polüsahhariidide sisaldusele traditsioonilises hiina meditsiinis kasutatavas rhizoma polygonati's [37], kuid kaaliumväetis suurendas tõhusalt saponiinide sisaldust [38450 kg·hm−2 K väetise kasutamine oli kaheaastase hariliku ženšenni kasvu ja saponiinide akumuleerumise seisukohalt parim [39]. N:P:K = 2:2:1 suhte korral olid hüdrotermaalse ekstrakti, harpagiidi ja harpagosiidi koguhulgad suurimad [40Kõrge N, P ja K suhe soodustas Pogostemon cablin kasvu ja suurendas lenduvate õlide sisaldust. Madal N, P ja K suhe suurendas Pogostemon cablin varreleheõli peamiste efektiivsete komponentide sisaldust [41YCH on viljatu pinnase taluv taim ja tal võivad olla spetsiifilised vajadused selliste toitainete nagu N, P ja K järele. Käesolevas uuringus oli looduslike YCH taimede muld võrreldes kultiveeritud YCH-ga suhteliselt viljatu: orgaanilise aine, kogu lämmastiku, kogu fosfori ja kogu kaaliumi sisaldus mullas oli vastavalt umbes 1/10, 1/2, 1/3 ja 1/3 kultiveeritud taimede omast. Seega võivad mulla toitainete erinevused olla veel üks põhjus kultiveeritud ja loodusliku YCH-s tuvastatud metaboliitide erinevustele. Weibao Ma jt.42] leiti, et teatud koguse lämmastikväetise ja fosforväetise lisamine parandas oluliselt seemnete saagikust ja kvaliteeti. Toitainete mõju YCH kvaliteedile ei ole aga selge ning meditsiiniliste materjalide kvaliteedi parandamiseks mõeldud väetamismeetmed vajavad täiendavat uurimist.Hiina taimsetel ravimitel on omadused, et „soodsad elupaigad suurendavad saaki ja ebasoodsad elupaigad parandavad kvaliteeti”.43Järkjärgulise ülemineku käigus metsikult kultiveeritud YCH-lt muutus taimede elupaik kuivast ja viljatust kõrbest stepist viljakaks põllumaaks, kus on rohkem vett. Kultiveeritud YCH elupaik on parem ja saagikus suurem, mis aitab rahuldada turu nõudlust. See parem elupaik tõi aga kaasa olulisi muutusi YCH metaboliitides; kas see soodustab YCH kvaliteedi parandamist ja kuidas saavutada teaduspõhiste kultiveerimismeetmete abil YCH kvaliteetne tootmine, vajab täiendavaid uuringuid.Simuleeriv elupaigakultuur on meetod looduslike ravimtaimede elupaiga ja keskkonnatingimuste simuleerimiseks, mis põhineb teadmistel taimede pikaajalisest kohanemisest konkreetsete keskkonnastressidega.43Simuleerides mitmesuguseid keskkonnategureid, mis mõjutavad metsikuid taimi, eriti autentsete meditsiiniliste materjalide allikatena kasutatavate taimede algset elupaika, kasutab see lähenemisviis teaduslikku disaini ja uuenduslikku inimese sekkumist, et tasakaalustada Hiina ravimtaimede kasvu ja sekundaarset metabolismi [43Meetodite eesmärk on saavutada optimaalne kord kvaliteetsete meditsiiniliste materjalide väljatöötamiseks. Simulatiivne elupaikade kultiveerimine peaks pakkuma tõhusat viisi YCH kvaliteetseks tootmiseks isegi siis, kui farmakodünaamiline alus, kvaliteedimarkerid ja keskkonnateguritele reageerimise mehhanismid on ebaselged. Seetõttu soovitame, et YCH kasvatamise ja tootmise teadusliku kavandamise ja põllu majandamise meetmed tuleks läbi viia, võttes arvesse loodusliku YCH keskkonnaomadusi, nagu kuiv, viljatu ja liivane pinnas. Samal ajal loodetakse ka, et teadlased viivad läbi põhjalikumaid uuringuid YCH funktsionaalse materjali aluse ja kvaliteedimarkerite kohta. Need uuringud võivad pakkuda YCH jaoks tõhusamaid hindamiskriteeriume ning edendada kvaliteetset tootmist ja tööstuse säästvat arengut. -
Taimne Fructus Amomi õli Looduslikud massaažihajutid 1kg Lahtiselt Amomum villosum eeterlik õli
Zingiberaceae perekond on allelopaatilistes uuringutes üha suuremat tähelepanu pälvinud oma rikkalike lenduvate õlide ja oma liikmete aromaatsuse tõttu. Varasemad uuringud on näidanud, et Curcuma zedoaria (zedoary) kemikaalid [40], Alpinia zerumbet (Pers.) BLBurtt ja RMSm. [41] ja harilik ingver (Zingiber officinale Rosc.) [42Ingveri perekonna ] ingveritaimed avaldavad allelopaatilist mõju maisi, salati ja tomati seemnete idanemisele ja seemikute kasvule. Meie praegune uuring on esimene aruanne A. villosumi (Zingiberaceae sugukonna liige) vartest, lehtedest ja noortest viljadest pärinevate lenduvate ainete allelopaatilise aktiivsuse kohta. Varte, lehtede ja noorte viljade õlisaagikus oli vastavalt 0,15%, 0,40% ja 0,50%, mis näitab, et viljad tootsid suuremas koguses lenduvaid õlisid kui varred ja lehed. Varte lenduvate õlide peamised komponendid olid β-pineen, β-fellandreen ja α-pineen, mis oli sarnane leheõli peamiste kemikaalide β-pineeni ja α-pineeni (monoterpeensed süsivesinikud) omaga. Teisest küljest oli noorte viljade õli rikas bornüülatsetaadi ja kampri (hapnikuga rikastatud monoterpeenid) poolest. Tulemusi toetasid Do N Dai leiud [30,32] ja Hui Ao [31] kes olid tuvastanud A. villosumi erinevatest organitest pärinevad õlid.
Nende peamiste ühendite taimekasvu pärssiva toime kohta teistes liikides on avaldatud mitmeid aruandeid. Shalinder Kaur leidis, et eukalüptist pärinev α-pineen pärssis märkimisväärselt Amaranthus viridis L. juurte pikkust ja võrse kõrgust 1,0 μL kontsentratsioonil [43] ja teine uuring näitas, et α-pineen pärssis varajast juurte kasvu ja põhjustas juurekoes oksüdatiivset kahjustust reaktiivsete hapnikuühendite suurenenud tekke kaudu [44Mõnedes aruannetes on väidetud, et β-pineen pärssis test-umbrohtude idanemist ja seemikute kasvu annusest sõltuval viisil, häirides membraani terviklikkust [45], muutes taime biokeemiat ja suurendades peroksidaaside ja polüfenooloksüdaaside aktiivsust [46β-fellandreen pärssis Vigna unguiculata (L.) Walp idanemist ja kasvu maksimaalselt kontsentratsioonil 600 ppm [47], samas kui kontsentratsioonil 250 mg/m3 pärssis kamper Lepidium sativum L. radikli ja võrse kasvu. [48Siiski on bornüülatsetaadi allelopaatilist toimet käsitlevaid uuringuid vähe. Meie uuringus oli β-pineeni, bornüülatsetaadi ja kampri allelopaatiline toime juurte pikkusele nõrgem kui lenduvatel õlidel, välja arvatud α-pineeni puhul, samas kui α-pineenirikas leheõli oli samuti fütotoksilisem kui vastavad lenduvad õlid A. villosumi vartest ja viljadest, mõlemad leiud viitavad sellele, et α-pineen võib olla selle liigi allelopaatia oluline kemikaal. Samal ajal viitasid tulemused ka sellele, et mõned viljaõlis sisalduvad ühendid, mida ei olnud külluses, võivad kaasa aidata fütotoksilise toime tekkimisele, mis vajab tulevikus edasist uurimist.Tavalistes tingimustes on allelokemikaalide allelopaatiline toime liigispetsiifiline. Jiang jt leidsid, et Artemisia sieversiana toodetud eeterlik õli avaldas Amaranthus retroflexus L.-le tugevamat mõju kui Medicago sativa L.-le, Poa annua L.-le ja Pennisetum alopecuroides (L.) Sprengile.49Teises uuringus avaldas Lavandula angustifolia Mill. lenduv õli erinevatele taimeliikidele erineval määral fütotoksilist toimet. Lolium multiflorum Lam. oli kõige tundlikum aktseptorliik, mille hüpokotüüli ja radikaali kasv pärsiti vastavalt 87,8% ja 76,7% annuses 1 μL/ml õlisid, kuid kurgi seemikute hüpokotüüli kasv vaevu mõjutatud oli [20Meie tulemused näitasid ka, et L. sativa ja L. perenne vahel oli erinev tundlikkus A. villosumi lenduvate ühendite suhtes.Sama liigi lenduvad ühendid ja eeterlikud õlid võivad kasvutingimuste, taimeosade ja tuvastusmeetodite tõttu kvantitatiivselt ja/või kvalitatiivselt erineda. Näiteks näitas üks aruanne, et musta sambuku (Sambucus nigra) lehtedest eralduvate lenduvate ühendite peamised ühendid olid püranoid (10,3%) ja β-karüofülleen (6,6%), samas kui lehtedest ekstraheeritud õlides oli ohtralt bensaldehüüdi (17,8%), α-bulneseeni (16,6%) ja tetrakosaani (11,5%) [50Meie uuringus avaldasid värsketest taimsetest materjalidest vabanevad lenduvad ühendid testtaimedele tugevamat allelopaatilist toimet kui ekstraheeritud lenduvad õlid, kusjuures reaktsioonide erinevused olid tihedalt seotud kahe preparaadi allelokeemiliste ühendite erinevustega. Lenduvate ühendite ja õlide täpseid erinevusi tuleb järgnevates katsetes edasi uurida.Lenduvate õlidega pinnaseproovides esinenud mikroobide mitmekesisuse ja mikroobikoosluse struktuuri erinevused olid seotud nii mikroorganismide vahelise konkurentsiga kui ka lenduvate õlide toksiliste mõjude ja kestusega pinnases. Vokou ja Liotiri [51] leiti, et nelja eeterliku õli (0,1 ml) lisamine kultiveeritud pinnasele (150 g) aktiveeris mullaproovide hingamist, isegi õlid erinesid oma keemilise koostise poolest, mis viitab sellele, et taimeõlisid kasutavad mulla mikroorganismid süsiniku- ja energiaallikana. Käesolevast uuringust saadud andmed kinnitasid, et kogu A. villosumi taime õlid aitasid kaasa mulla seeneliikide arvu ilmsele suurenemisele 14. päevaks pärast õli lisamist, mis näitab, et õli võib pakkuda süsinikuallikat rohkematele mulla seentele. Teises uuringus teatati leiust: mulla mikroorganismid taastasid oma esialgse funktsiooni ja biomassi pärast ajutist varieeruvusperioodi, mille põhjustas Thymbra capitata L. (Cav) õli lisamine, kuid suurima annusega õli (0,93 µL õli grammi mulla kohta) ei võimaldanud mulla mikroorganismidel taastada esialgset funktsionaalsust [52]. Käesolevas uuringus, mis põhines mulla mikrobioloogilisel analüüsil pärast erinevate päevade ja kontsentratsioonidega töötlemist, oletasime, et mulla bakterite kooslus taastub mitme päeva pärast. Seevastu seente mikrobioota ei saa naasta oma algsesse olekusse. Järgmised tulemused kinnitavad seda hüpoteesi: õli kõrge kontsentratsiooni selge mõju mulla seente mikrobioomi koostisele selgus peamiste koordinaatide analüüsi (PCoA) abil ning soojuskaardi esitused kinnitasid taas, et 3,0 mg/ml õliga (nimelt 0,375 mg õli grammi mulla kohta) töödeldud mulla seente koosluse koosseis perekonna tasandil erines oluliselt teistest töötlustest. Praegu on monoterpeensete süsivesinike või hapnikuga rikastatud monoterpeenide lisamise mõju kohta mulla mikroobide mitmekesisusele ja koosluse struktuurile veel vähe uuringuid. Mõned uuringud on teatanud, et α-pineen suurendas mulla mikroobide aktiivsust ja Methylophilaceae (metülotroofide rühm, proteobakterid) suhtelist arvukust madala niiskusesisalduse korral, mängides olulist rolli süsinikuallikana kuivemates muldades [53Samamoodi on A. villosumi kogu taime lenduv õli, mis sisaldab 15,03% α-pineeni (Lisatabel S1) suurendas ilmselgelt proteobakterite suhtelist arvukust kontsentratsioonidel 1,5 mg/ml ja 3,0 mg/ml, mis viitab sellele, et α-pineen võib toimida mulla mikroorganismide ühe süsinikuallikana.A. villosumi erinevate organite poolt toodetud lenduvatel ühenditel oli L. sativa ja L. perenne'i suhtes erineval määral allelopaatiline toime, mis oli tihedalt seotud A. villosumi taimeosade keemiliste koostisosadega. Kuigi lenduva õli keemiline koostis on kinnitust leidnud, on A. villosumi poolt toatemperatuuril vabanevad lenduvad ühendid teadmata ja need vajavad edasist uurimist. Lisaks väärib kaalumist ka erinevate allelokemikaalide sünergiline efekt. Pinnase mikroorganismide osas peame lenduva õli mõju pinnase mikroorganismidele igakülgseks uurimiseks läbi viima põhjalikumaid uuringuid: pikendama lenduva õli töötlemisaega ja tegema kindlaks lenduva õli keemilise koostise erinevused mullas erinevatel päevadel. -
Puhas Artemisia capillaris õli küünalde ja seepide valmistamiseks hulgimüügi hajuti eeterlik õli, uus pilliroopõleti hajutitele
Näriliste mudeli disain
Loomad jagati juhuslikult viide viieteistkümnest hiirest koosnevasse rühma. Kontrollrühma ja mudelrühma hiirtele manustati sondigaseesamiõli6 päeva jooksul. Positiivse kontrollrühma hiirtele manustati sondiga bifendaadi tablette (BT, 10 mg/kg) 6 päeva jooksul. Katserühmi töödeldi 6 päeva jooksul seesamiõlis lahustatud 100 mg/kg ja 50 mg/kg AEO-ga. 6. päeval töödeldi kontrollrühma seesamiõliga ja kõiki teisi rühmi töödeldi ühekordse annusega 0,2% CCl4 seesamiõlis (10 ml/kg)intraperitoneaalne süstimineSeejärel lasti hiirtel vett tarbida ja retrobulbaarsetest veresoontest võeti vereproovid; kogutud verd tsentrifuugiti kiirusel 3000 ×g10 minutit seerumi eraldamiseks.Emakakaela dislokatsioontehti kohe pärast vere võtmist ja maksaproovid eemaldati viivitamatult. Üks osa maksaproovist säilitati koheselt temperatuuril –20 °C kuni analüüsini ja teine osa lõigati välja ning fikseeriti 10%formaliinlahus; ülejäänud kudesid säilitati histopatoloogiliseks analüüsiks temperatuuril −80 °C (Wang jt, 2008,Hsu jt, 2009,Nie jt, 2015).
Seerumi biokeemiliste parameetrite mõõtmine
Maksakahjustust hinnati, hinnatesensümaatilised aktiivsusedseerumi ALT ja AST sisalduse määramiseks kasutati vastavaid kaubanduslikke komplekte vastavalt komplektide juhistele (Nanjing, Jiangsu provints, Hiina). Ensümaatilist aktiivsust väljendati ühikutes liitri kohta (U/l).
MDA, SOD, GSH ja GSH-P mõõtminexmaksahomogenaatides
Maksakuded homogeniseeriti külma füsioloogilise soolalahusega vahekorras 1:9 (massiprotsent/maht, maks:soolalahus). Homogenaadid tsentrifuugiti (2500 ×g10 minutit), et koguda supernatant järgnevateks määramisteks. Maksakahjustust hinnati MDA ja GSH tasemete ning SOD ja GSH-P maksamõõtmiste põhjal.xaktiivsused. Kõik need määrati komplekti juhiste järgi (Nanjing, Jiangsu provints, Hiina). MDA ja GSH tulemused väljendati nmol-ides mg valgu kohta (nmol/mg prot) ning SOD ja GSH-P aktiivsusedxväljendati U-na mg valgu kohta (U/mg prote).
Histopatoloogiline analüüs
Värskelt saadud maksa osad fikseeriti 10% puhverdatud lahuses.paraformaldehüüdfosfaatlahusega. Seejärel asetati proov parafiini, lõigati 3–5 μm paksusteks lõikudeks ja värvitihematoksüliinjaeosiin(H&E) standardprotseduuri kohaselt ja lõpuks analüüsitivalgusmikroskoopia(Tian jt, 2012).
Statistiline analüüs
Tulemused väljendati keskmisena ± standardhälve (SD). Tulemusi analüüsiti statistikaprogrammi SPSS Statistics versiooniga 19.0. Andmetele tehti dispersioonanalüüs (ANOVA,p< 0,05), millele järgnesid Dunnetti test ja Dunnetti T3 test, et määrata statistiliselt olulisi erinevusi erinevate katserühmade väärtuste vahel. Oluliseks erinevuseks loeti tasep< 0,05.
Tulemused ja arutelu
Volitatud ettevõtja sidusrühmad
GC/MS-analüüsi põhjal leiti, et AEO sisaldas 25 komponenti, mis elueerusid 10–35 minuti jooksul, ja identifitseeriti 21 komponenti, mis moodustasid 84% eeterlikust õlist (Tabel 1). Lenduv õli sisaldasmonoterpenoidid(80,9%), seskviterpenoidid (9,5%), küllastunud hargnemata süsivesinikud (4,86%) ja mitmesugune atsetüleen (4,86%). Võrreldes teiste uuringutega (Guo jt, 2004) leidsime AEO-st rohkelt monoterpenoide (80,90%). Tulemused näitasid, et AEO kõige levinum koostisosa on β-tsitronellool (16,23%). Teiste AEO peamiste komponentide hulka kuuluvad 1,8-tsineool (13,9%),kamper(12,59%),linalool(11,33%), α-pineen (7,21%), β-pineen (3,99%),tümooli(3,22%) jamürtseen(2,02%). Keemilise koostise varieeruvus võib olla seotud keskkonnatingimustega, millega taim kokku puutus, näiteks mineraalvesi, päikesevalgus, arenguetapp jatoitumine.
-
Puhas Saposhnikovia divaricata õli küünalde ja seepide valmistamiseks hulgimüügi hajuti eeterlik õli, uus pillirooglampide hajutitele
2.1. SDE ettevalmistamine
SD risoomid osteti kuivatatud ürdina firmalt Hanherb Co. (Guri, Korea). Taimse materjali taksonoomiliselt kinnitas dr Go-Ya Choi Korea Idameditsiini Instituudist (KIOM). Kinkeeksemplar (number 2014 SDE-6) deponeeriti Korea Standardsete Taimsete Ressursside Herbaariumisse. SD kuivatatud risoome (320 g) ekstraheeriti kaks korda 70% etanooliga (2-tunnise tagasijooksuga) ja seejärel kontsentreeriti ekstrakt alandatud rõhul. Keets filtriti, lüofiliseeriti ja säilitati temperatuuril 4 °C. Kuivatatud ekstrakti saagis toormaterjalidest oli 48,13% (massi järgi).
2.2. Kvantitatiivne kõrgefektiivne vedelikkromatograafia (HPLC) analüüs
Kromatograafiline analüüs viidi läbi HPLC-süsteemi (Waters Co., Milford, MA, USA) ja fotodioodreadetektoriga. SDE HPLC-analüüsi jaoks kasutati prim-O-glükosüültsimifugiini standard osteti Korea Traditsioonilise Meditsiini Tööstuse Edendamise Instituudist (Gyeongsan, Korea) jasek-O-glükosüülhamaudool ja 4′-O-β-D-glükosüül-5-O-metüülvisamminool eraldati meie laboris ja identifitseeriti spektraalanalüüside, peamiselt NMR ja MS abil.
SDE proovid (0,1 mg) lahustati 70% etanoolis (10 ml). Kromatograafiline eraldamine viidi läbi XSelect HSS T3 C18 kolonniga (4,6 × 250 mm, 5μm, Waters Co., Milford, MA, USA). Liikuv faas koosnes atsetonitriilist (A) ja 0,1% äädikhappest vees (B) voolukiirusega 1,0 ml/min. Kasutati mitmeastmelist gradiendiprogrammi järgmiselt: 5% A (0 min), 5–20% A (0–10 min), 20% A (10–23 min) ja 20–65% A (23–40 min). Detekteerimislainepikkust skaneeriti lainepikkusel 210–400 nm ja registreeriti lainepikkusel 254 nm. Süstimismaht oli 10,0μL. Kolme kromooni määramiseks valmistati standardlahused lõppkontsentratsiooniga 7,781 mg/ml (prim-O-glükosüültsimifugiin), 31,125 mg/ml (4′-O-β-D-glükosüül-5-O-metüülvisamminool) ja 31,125 mg/ml (sek-O-glükosüülhamaudool) metanoolis ja hoiti temperatuuril 4 °C.
2.3. Põletikuvastase toime hindamineIn vitro
2.3.1. Rakukultuur ja proovide töötlemine
RAW 264.7 rakud saadi Ameerika Tüpkultuuride Kollektsioonist (ATCC, Manassas, VA, USA) ja kasvatati DMEM söötmes, mis sisaldas 1% antibiootikume ja 5,5% FBS-i. Rakke inkubeeriti niisutatud atmosfääris 5% CO2-ga temperatuuril 37 °C. Rakkude stimuleerimiseks asendati sööde värske DMEM söötmega ja lisati lipopolüsahhariidi (LPS, Sigma-Aldrich Chemical Co., St. Louis, MO, USA) temperatuuril 1 °C.μµg/ml lisati SDE juuresolekul või puudumisel (200 või 400μg/ml) veel 24 tundi.
2.3.2. Lämmastikoksiidi (NO), prostaglandiin E2 (PGE2) ja tuumorinekroosifaktori määramineα(TNF-α) ja interleukiin-6 (IL-6) tootmine
Rakke töödeldi SDE-ga ja stimuleeriti LPS-iga 24 tundi. NO tootmist analüüsiti nitriti mõõtmisega Griessi reagendi abil vastavalt varasemale uuringule [12Põletikuliste tsütokiinide PGE2, TNF-i sekretsioonαja IL-6 määrati ELISA komplekti (R&D systems) abil vastavalt tootja juhistele. SDE mõju NO ja tsütokiinide tootmisele määrati lainepikkustel 540 nm või 450 nm, kasutades Wallac EnVision™mikroplaadilugeja (PerkinElmer).
2.4. Osteoartriidi vastase toime hindamineIn vivo
2.4.1. Loomad
Isased Sprague-Dawley rotid (7 nädala vanused) osteti firmalt Samtako Inc. (Osan, Korea) ja neid hoiti kontrollitud tingimustes 12-tunnise valguse/pimeduse tsükliga°C ja% õhuniiskust. Rottidele anti laboritoitu ja vett.piiramatultKõik katsemenetlused viidi läbi vastavalt Riiklike Tervishoiuinstituutide (NIH) suunistele ja need kiitis heaks Daejeoni ülikooli (Daejeon, Korea Vabariik) loomade hooldamise ja kasutamise komitee.
2.4.2. OA esilekutsumine MIA-ga rottidel
Loomad randomiseeriti ja määrati ravirühmadesse enne uuringu algust (rühma kohta). MIA lahus (3 mg/50μKetamiini ja ksülasiini seguga esilekutsutud anesteesia all süstiti parema põlve intraartikulaarsesse ruumi otse 0,9% soolalahust. Rotid jagati juhuslikult nelja rühma: (1) soolalahuse rühm ilma MIA süstita, (2) MIA rühm MIA süstiga, (3) SDE-ga ravitud rühm (200 mg/kg) MIA süstiga ja (4) indometatsiiniga (IM) ravitud rühm (2 mg/kg) MIA süstiga. Rottidele manustati suu kaudu SDE-d ja IM-i 1 nädal enne MIA süstimist 4 nädala jooksul. Selles uuringus kasutatud SDE ja IM annused põhinesid varasemates uuringutes kasutatud annustel [10,13,14].
2.4.3. Tagumise käpa raskusjaotuse mõõtmised
Pärast OA esilekutsumist oli tagakäppade raskuskandevõime algne tasakaal häiritud. Kaalukandetaluvuse muutuste hindamiseks kasutati teovõimetuse testerit (Linton Instrumentation, Norfolk, Ühendkuningriik). Rotid paigutati ettevaatlikult mõõtekambrisse. Tagajäseme poolt avaldatav raskuskandejõud keskmistati 3 sekundi jooksul. Kaalu jaotussuhe arvutati järgmise võrrandi abil: [kaal paremal tagajäsemedel / (kaal paremal tagajäsemedel + kaal vasakul tagajäsemedel)] × 100 [15].
2.4.4. Seerumi tsütokiinide taseme mõõtmine
Vereproove tsentrifuugiti 10 minutit kiirusel 1500 g temperatuuril 4 °C; seejärel koguti seerum ja säilitati temperatuuril −70 °C kuni kasutamiseni. IL-1 tasemedβ, IL-6, TNF-αja PGE2 sisaldust seerumis mõõdeti R&D Systemsi (Minneapolis, MN, USA) ELISA komplektide abil vastavalt tootja juhistele.
2.4.5. Reaalajas kvantitatiivne RT-PCR analüüs
Põlveliigese koest ekstraheeriti totaalne RNA, kasutades TRI reagendi® (Sigma-Aldrich, St. Louis, MO, USA), pöördtranskribeeriti cDNA-ks ja PCR-amplifitseeriti, kasutades TM One Step RT PCR komplekti SYBR rohelisega (Applied Biosystems, Grand Island, NY, USA). Reaalajas kvantitatiivne PCR viidi läbi, kasutades Applied Biosystems 7500 reaalaja PCR süsteemi (Applied Biosystems, Grand Island, NY, USA). Praimerite järjestused ja sondi järjestus on toodud tabelis.1Proovi cDNA alikvoote ja võrdset kogust GAPDH cDNA-d amplifitseeriti TaqMan® Universal PCR põhiseguga, mis sisaldas DNA polümeraasi vastavalt tootja juhistele (Applied Biosystems, Foster, CA, USA). PCR tingimused olid 2 minutit temperatuuril 50 °C, 10 minutit temperatuuril 94 °C, 15 sekundit temperatuuril 95 °C ja 1 minut temperatuuril 60 °C 40 tsükli jooksul. Sihtgeeni kontsentratsioon määrati võrdleva Ct (künnistsüklite arv amplifikatsioonigraafiku ja läve ristumispunktis) meetodi abil vastavalt tootja juhistele.
