Puhas Saposhnikovia divaricata õli küünla ja seebi valmistamisele hulgimüügi difuusori eeterlik õli uus pilliroopõleti difuusoritele

Puhas Saposhnikovia divaricata õli küünla ja seebi valmistamiseks, hulgimüügi difuusori eeterlik õli, uus pilliroopõletushajutite jaoks Esiletõstetud pilt

lühike kirjeldus:

2.1. SDE ettevalmistamine

SD risoomid osteti kuivatatud ürtena ettevõttest Hanherb Co. (Guri, Korea). Taimseid materjale kinnitas taksonoomiliselt dr Go-Ya Choi Korea idamaise meditsiini instituudist (KIOM). Vautšeri näidis (number 2014 SDE-6) deponeeriti Korea standardsete ravimtaimede herbaariumis. Kuivatatud SD risoomid (320 g) ekstraheeriti kaks korda 70% etanooliga (2-tunnise tagasijooksuga) ja ekstrakt kontsentreeriti seejärel alandatud rõhul. Keetmine filtriti, lüofiliseeriti ja säilitati temperatuuril 4 °C. Kuivatatud ekstrakti saagis toores lähteainetest oli 48,13% (mass/mass).

2.2. Kvantitatiivne kõrgjõudlusega vedelikkromatograafia (HPLC) analüüs

Kromatograafiline analüüs viidi läbi HPLC süsteemiga (Waters Co., Milford, MA, USA) ja fotodioodide massiividetektoriga. SDE HPLC analüüsi jaoks on esmaneO- glükosüültsimifugiini standard osteti Korea Promotion Institute for Traditional Medicine Industry (Gyeongsan, Korea) jasec-O- glükosüülhamaudool ja 4'-O-β-D-glükosüül-5-O-metüülvisamminool isoleeriti meie laboris ja tuvastati spektraalanalüüsidega, peamiselt NMR ja MS abil.

SDE proovid (0,1 mg) lahustati 70% etanoolis (10 ml). Kromatograafiline eraldamine viidi läbi kolonniga XSelect HSS T3 C18 (4,6 × 250 mm, 5μm, Waters Co., Milford, MA, USA). Liikuv faas koosnes atsetonitriilist (A) ja 0,1% äädikhappest vees (B) voolukiirusel 1,0 ml/min. Mitmeastmelist gradiendiprogrammi kasutati järgmiselt: 5% A (0 min), 5–20% A (0–10 min), 20% A (10–23 min) ja 20–65% A (23–40 min). ). Detekteerimislainepikkust skaneeriti lainepikkusel 210–400 nm ja registreeriti lainepikkusel 254 nm. Süstimismaht oli 10,0μL. Kolme kromooni määramiseks valmistati standardlahused lõppkontsentratsiooniga 7,781 mg/mL (prim-O-glükosüültsimifugiin), 31,125 mg/ml (4′-O-β-D-glükosüül-5-O-metüülvisaminool) ja 31,125 mg/ml (sec-O-glükosüülhamaudool) metanoolis ja hoiti temperatuuril 4 °C.

2.3. Põletikuvastase toime hindamineIn vitro

2.3.1. Rakukultuur ja proovide töötlemine

RAW 264.7 rakud saadi Ameerika tüüpkultuuride kollektsioonist (ATCC, Manassas, VA, USA) ja neid kasvatati DMEM söötmes, mis sisaldas 1% antibiootikume ja 5,5% FBS-i. Rakke inkubeeriti 5% CO2 niisutatud atmosfääris temperatuuril 37 °C. Rakkude stimuleerimiseks asendati sööde värske DMEM söötmega ja lipopolüsahhariidiga (LPS, Sigma-Aldrich Chemical Co., St. Louis, MO, USA) temperatuuril 1 °C.μg/ml lisati SDE juuresolekul või puudumisel (200 või 400μg/mL) veel 24 tundi.

2.3.2. Lämmastikoksiidi (NO), prostaglandiin E2 (PGE2), kasvaja nekroosifaktori määramineα(TNF-α) ja interleukiin-6 (IL-6) tootmine

Rakke töödeldi SDE-ga ja stimuleeriti LPS-ga 24 tundi. NO tootmist analüüsiti nitritite mõõtmisega Griessi reaktiivi abil vastavalt eelmisele uuringule [12]. Põletikuliste tsütokiinide PGE2, TNF- sekretsioonαja IL-6 määrati ELISA komplekti (R&D süsteemid) abil vastavalt tootja juhistele. SDE mõju NO ja tsütokiinide tootmisele määrati 540 nm või 450 nm juures, kasutades Wallac EnVisionit.™mikroplaadi lugeja (PerkinElmer).

2.4. Osteoartriidi aktiivsuse hindamineIn vivo

2.4.1. Loomad

Isased Sprague-Dawley rotid (7 nädala vanused) osteti ettevõttelt Samtako Inc. (Osan, Korea) ja neid hoiti kontrollitud tingimustes 12-tunnise valguse/pimeduse tsükliga°C ja% niiskus. Rottidele anti laboratoorset toitu ja vettad libitum. Kõik katseprotseduurid viidi läbi kooskõlas riiklike tervishoiuinstituutide (NIH) juhistega ja kiitis heaks Daejeoni ülikooli (Daejeon, Korea Vabariik) loomade hooldamise ja kasutamise komitee.

2.4.2. OA indutseerimine MIA-ga rottidel

Loomad randomiseeriti ja määrati ravirühmadesse enne uuringu algust (rühma kohta). MIA lahus (3 mg/50μL 0,9% soolalahust) süstiti ketamiini ja ksülasiini seguga indutseeritud anesteesia all otse parema põlve intraartikulaarsesse ruumi. Rotid jagati juhuslikult nelja rühma: (1) füsioloogilise lahuse rühm ilma MIA süstita, (2) MIA rühm MIA süstiga, (3) SDE-ga ravitud rühm (200 mg/kg) MIA süstiga ja (4) ) indometatsiiniga (IM-) ravitud rühma (2 mg/kg) MIA süstiga. Rottidele manustati suukaudselt SDE-d ja IM-i 1 nädal enne MIA süstimist 4 nädala jooksul. Selles uuringus kasutatud SDE ja IM annus põhines varasemates uuringutes kasutatud annustel.10,13,14].

2.4.3. Tagakäpa raskuse kandevõime jaotuse mõõtmised

Pärast OA esilekutsumist oli tagakäppade raskust kandmise võime algne tasakaal häiritud. Kaalutaluvuse muutuste hindamiseks kasutati töövõimetuse testerit (Linton instrumentation, Norfolk, UK). Rotid asetati ettevaatlikult mõõtekambrisse. Tagajäseme raskust kandev jõud keskmistati 3 sekundi jooksul. Kaalujaotuse suhe arvutati järgmise võrrandi abil: [parema tagajäseme kaal/(parema tagajäseme kaal + vasaku tagajäseme kaal)] × 100 [15].

2.4.4. Seerumi tsütokiini taseme mõõtmine

Vereproove tsentrifuugiti 1500 g juures 10 minutit temperatuuril 4 °C; seejärel seerum koguti ja säilitati kuni kasutamiseni temperatuuril –70 °C. IL-1 tasemedβ, IL-6, TNF-α, ja PGE2 seerumis mõõdeti R&D Systemsi (Minneapolis, MN, USA) ELISA komplektide abil vastavalt tootja juhistele.

2.4.5. Reaalajas kvantitatiivne RT-PCR analüüs

Kogu RNA ekstraheeriti põlveliigese kudedest, kasutades TRI reagenti® (Sigma-Aldrich, St. Louis, MO, USA), pöördtranskribeeriti cDNA-ks ja amplifitseeriti PCR-iga, kasutades TM One Step RT PCR komplekti SYBR rohelisega (Applied Biosystems). , Grand Island, NY, USA). Reaalajas kvantitatiivne PCR viidi läbi, kasutades Applied Biosystems 7500 Real-Time PCR süsteemi (Applied Biosystems, Grand Island, NY, USA). Praimeri järjestused ja sondi järjestus on näidatud tabelis1. Proovi cDNA-de alikvoodid ja võrdne kogus GAPDH cDNA-d amplifitseeriti DNA polümeraasi sisaldava TaqMan® Universal PCR põhiseguga vastavalt tootja juhistele (Applied Biosystems, Foster, CA, USA). PCR tingimused olid 2 minutit temperatuuril 50 °C, 10 minutit temperatuuril 94 °C, 15 sekundit temperatuuril 95 °C ja 1 min temperatuuril 60 °C 40 tsükli jooksul. Sihtgeeni kontsentratsioon määrati, kasutades võrdlusmeetodit Ct (lävitsükli arv amplifikatsioonigraafiku ja läve ristpunktis) vastavalt tootja juhistele.

FOB hind:0,5–9999 USA dollarit tk

Min.tellimuse kogus:100 tükki / tükki

Tarnevõime:10000 tükki kuus

Saada meile e-kiri

Toote üksikasjad

Tootesildid

Osteoartriit (OA) on kõige sagedasem luu- ja lihaskonna haigus ning kõige levinum degeneratiivne liigesehaigus eakatel.1]. OA on seisund, mis on osaliselt põhjustatud vigastusest, kõhre struktuuri ja funktsiooni kadumisest ning põletikueelsete ja põletikuvastaste radade reguleerimise häiretest.2,3]. See mõjutab peamiselt sünoviaalliigeste liigesekõhre ja subkondraalset luud ning põhjustab liigesepuudulikkust, mis põhjustab valu raskuse kandmisel, sealhulgas kõndimisel ja seismisel.4].

OA vastu ei saa ravida, kuna kõhre on väga raske taastada, kui see on hävitatud [5]. Ravi eesmärgiks on valu leevendamine, liigeste liikuvuse säilitamine või parandamine, liigeste tugevuse suurendamine ja haiguse invaliidistavate mõjude minimeerimine. OA farmakoloogilise ravi eesmärk on vähendada valu, et tõsta patsiendi liigeste funktsiooni ja elukvaliteeti. Kuigi kõhre hävitamine on OA peamine sündmus, on kollageeni lagunemine peamine juhtum, mis määrab OA pöördumatu progresseerumise koos põletikuga.6,7]. Põletikuvastase ja kondroprotektiivse toimega ravi peaks leevendama valu ja säilitama maatriksi terviklikkust OA patsientidel.

Seetõttu on põletiku vähendamine tõenäoliselt kasulik OA ravis. Hiljutised uuringud viitavad taimsete ressursside kaitsvale rollile OA progresseerumisel kondrotsüütide põletiku leevendamisel ja kõhre edasise hävimise leevendamisel tänu nende võimele suhelda liigestega seotud kudedega, mille tulemuseks on liigesevalu leevendamine.8].

JuurSaposhnikovia divaricataSchischkinit (Umbelliferae) on traditsioonilises meditsiinis laialdaselt kasutatud peavalu, valu, põletiku ja artriidi raviks Koreas ja Hiinas.9,10]. Mitmekesine farmakoloogiline toimeSaposhnikovia divaricata(SD) sisaldavad ka põletikuvastaseid, valuvaigistavaid, palavikuvastaseid ja artriidivastaseid omadusi.9,11]. Hiljutine uuring näitas, et SD kromooni ekstraktil on potentsiaalne reumatoidartriidivastane toime kollageenist põhjustatud artriidi hiiremudelis.10]; Siiski on läbi viidud vähe uuringuid, mis toetavad põletikuvastast ja artriidivastast toimetSaposhnikovia divaricataväljavõte (SDE).

Seetõttu uuriti käesolevas uuringus SD 70% etanooliekstrakti põletikuvastast ja osteoartriidivastast toimet. Esiteks hinnati SDE põletikuvastast toimetin vitroLPS-indutseeritud RAW 264.7 rakkudes. Järgmisena mõõdeti SDE osteoartriidivastast toimet, hinnates mononaatriumjodoatsetaadi (MIA-) indutseeritud OA rotimudelis kehakaalu kandvat jaotumist, liigesekõhre lagunemist ja põletikulisi reaktsioone.